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• 制取不同濃度的標準蛋白溶液：可取普通潔凈的試管7支，1號管取放0.1mL去離子水作為空白組，2-6號用微量移液器分別加入1.0mg/mL的BSA溶液0.02、0.04、0.06、0.08、0.10mL，然后每管均用去離子水補充到0.1mL，另外7號試管取放待測蛋白溶液0.1mL，所有試管用渦旋混勻器充分混勻；
• 加入染色試劑：用移液器或者移液管向上述試管分別加入3.0mL考馬斯亮藍G250試劑，用渦旋混勻器輕輕快速混合均勻；
• 比色：考馬斯亮藍試劑與蛋白質結合速度快，2-5分鐘即可完成，1小時內保持穩(wěn)定，故可以在溶液靜置5分鐘后在分光光度計上測定各試管溶液在波長595nm處的光吸收值A₅₉₅；
• 比色時使用的比色皿選用玻璃或者塑料比色皿，不要使用石英或者硅膠比色皿，因為考馬斯亮藍染料容易結合附著于石英或硅膠材料上，不易洗去染色。
• 比色完成后及時用水清洗，再用40%乙醇潤洗，洗去顏色，最后再用水洗凈。
• 如果使用的是塑料比色皿，乙醇潤洗時間不宜過長，決不能在乙醇或者丙酮中長時間浸泡，因為那會導致塑料比色皿溶脹失真。
• 制作標準曲線：以標準蛋白溶液濃度（mg/mL）為橫坐標，吸光度值A₅₉₅為縱坐標作圖，可進行直線擬合，即可得到一條標準曲線；
• 計算待測蛋白質濃度：將分光光度計測出的待測蛋白質溶液的光吸收度A₅₉₅值，對照標準曲線即可算出待測蛋白質濃度。

點成DEN-600光度計， 是一款緊湊、便攜、可電池供電的光度計，可以方便地放置在生物安全柜、培養(yǎng)箱中，該設備可容納10mm光程的標準比色皿、普通圓底試管或離心管等。USB連接和DEN軟件可進行數(shù)據傳輸、數(shù)據處理和計算。600 nm波長光學系統(tǒng)設計可以進行如下測量：估算細胞總數(shù)（OD600）、濁度測量（McFarland單位）、蛋白質濃度測量（Bradford 蛋白質測定法）。分光光度計通常應用于這些領域，因此DEN-600可作為分光光度計的平價替代品。